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首先研究了ExPh和ExBT的光物理性质,发现在乙腈溶液中,探针无荧光,而在水溶液中可以发出明亮的荧光。进一步研究水分含量的变化与探针荧光的关系,当水分数fw>80 %时,探针的荧光发射强度明显增强。说明ExPh和ExBT具有聚集诱导发光(AIE)性质。
接下来,通过吸收和荧光光谱研究了ExBT对Fe(III)螯合性能。随着Fe(III)浓度的增加,ExBT的紫外-可见吸收强度逐渐增加,而荧光逐渐降低。对于羟基受保护的分子,ExBT-OMe荧光强度不受Fe(III)浓度变化的影响, 证明ExBT上酚羟基会螯合Fe(III)。
为了避免金属螯合作用过早的发生,制备了二磷酸酯ExPhos作为磷酸酶激活的前药,并研究ExPhos的ALP激活及Fe(III)螯合性能。研究表明ExPhos不能螯合Fe(III),不发生荧光猝灭。然而,在ALP存在的情况下,荧光发射随Fe(III)浓度的增加而减弱。其中,ExPhos荧光发射的比率变化归因于由双磷酸酯到单磷酸酯到双酚的脱磷酸化过程,可由LCMS分析证实。实验结果表明ExPhos的荧光能够被ALP激活及进一步被Fe(III)猝灭。
为了评估探针的诊断和杀菌潜力。利用ExBT和ExPhos分别孵育绿脓杆菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌所形成生物膜进行测试发现,ExBT能够产生强烈的荧光发射,且随着时间的推移逐渐减弱。而ExPhos则表现为先出现微弱的荧光,其荧光发射强度逐渐增大,随后逐渐减弱。这说明探针ExPhos能够被内源性的碱性磷酸酶激活,通过荧光成像诊断细菌,并进一步与Fe(III)螯合杀死细菌。
最后研究了探针ExPhos的杀菌能力。用PI/SYTO的双色荧光来指示细菌的死活,绿色代表活细菌,红色代表死细菌。当只使用头孢哌酮时,绿色荧光较强,而加入ExBT、ExPhos或
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